Sérologické testy: typy, použití

Video: Video lekce v chemii "Typy chemických reakcí v organické chemii"

Laboratorní diagnostika prakticky všech infekčních onemocnění je založena na detekci krve v protilátek pacienta, které jsou vyráběny podle patogenem antigenem, sérologické metody. Vešli do lékařské praxe na konci devatenáctého - počátku dvacátého století.

Rozvoj vědy pomohla definovat antigenní strukturu mikrobů a chemických vzorců jejich toxiny. Je možné vytvořit nejen léčebný, ale i diagnostické sérum. Získávají se podáváním oslabené patogeny laboratorních zvířat. Po několika dnech namáčení v krvi králíků nebo myší připravené produkty používané pro identifikaci bakterií nebo jejich toxiny pomocí sérologických testů.

Směrem ven projevem této reakce závisí na podmínkách a typu přípravku a stavu antigenů v krvi pacienta. Pokud mikroby jsou nerozpustné částice, se usadí, lyžovány, imobilizovaný nebo vázán v séru. V případě, že antigeny jsou rozpustné, zdá se, fenomén neutralizaci nebo srážení.

aglutinace (PA)

Sérologické aglutinační test je vysoce specifická. Je snadné hrát a je zcela jasné, rychle detekovat přítomnost antigenů krevní sérum trpěliví. To se používá pro nastavení Vidal reakci (diagnózu tyfu a paratyfu) a Weigl (tyfu).

Je založen na specifické interakci mezi lidskými protilátkami (nebo aglutininy) a mikrobiálních buněk (agglyutenogenami). Po jejich interakci jsou vytvořeny částice, které srážejí. To je pozitivní znamení. Pro nastavení reakčních živé nebo mrtvé mikrobiální prostředky mohou být použity, houby, prvoci, krvinky a somatické buňky.

Video: Termite. Výběr reakcemi termitové směsi. (Metal Chemistry)

Chemická reakce je rozdělen do dvou fází:

1. Specifické protilátky sloučenina (AT) s antigeny (Ag).
2. Nespecifická - depozice konglomerátů AG-AT, tedy tvorbu aglutinaci.

Reakce nepřímé aglutinace (TPHA)

Tato reakce je citlivější než předchozí. To se používá pro diagnostiku onemocnění způsobených bakteriemi, intracelulárními parazity, prvoky. Je tak specifická, že může detekovat i velmi nízké koncentrace protilátek.

Pro jeho formulace za použití červené krvinky čistí ovčího a červené krevní buňky lidského předem ošetřených protilátek nebo antigenů (záleží na tom, co laboratoř chce najít). V některých případech, lidské červené krvinky působí imunoglobuliny. Sérologická odezva erytrocytů je považován za platný, pokud došlo k vysrážení jeho na dně zkumavky. Pozitivní reakce se dá říci, když jsou buňky uspořádány ve tvaru obráceného deštníku, zabírající celé dno. Negativní reakce je zaznamenána, když se červené krvinky usadit ve formě sloupce nebo tlačítek ve středu dna.

srážecí reakce (RP)

Sérologické reakce tohoto typu slouží k identifikaci velmi malé částice antigeny. To může být, například, proteiny (nebo jejich části), sloučeniny z proteinů s lipidy nebo sacharidy, části bakterií a jejich toxinů.

Séra pro reakci se získá umělé napadení zvířat, typicky králíků. V této metodě, můžete získat absolutně žádný srážecí sérum. Staging sérologické srážení podobný mechanismus účinku na aglutinaci. Protilátky obsažené v séru se vážou na antigeny koloidní roztok tvořit velké proteinové molekuly, které se usazují na dně zkumavky nebo na substrátu (gel). Tato metoda je považována za vysoce specifický a může detekovat i stopová množství této látky.

Používá se k diagnostice mor, tularemie, antrax meningitida a další nemoci. Také se podílejí na soudní přezkoumání.

Test srážení Gel

Sérologické testy mohou být provedeny nejen v kapalném prostředí, ale v agarózovém gelu. To se nazývá difuzní srážení. S tím, zkoumat složení komplexních antigenních směsí. Tato metoda je založena na chemotaxi antigenů na protilátky, a naopak. Gel se pohybují směrem k sobě při různých rychlostech a setkání tvořit srážení linky. Každý řádek - jedna sada K-AT.

Neutralizace exotoxinu antitoxin (RN)

Antitoxická sérum může neutralizovat exotoxin, který mikroorganismy produkují. Na základě těchto údajů a sérologické testy na bázi. Mikrobiologie používá tuto metodu pro titraci séra, toxiny a toxoidy, jakož i jejich terapeutické aktivity. Síla neutralizace toxinu je určena konvenčními jednotkami - AE.

Navíc vzhledem k této reakci lze určit druh nebo druhy patřící exotoxin. To se používá v diagnostice tetanu, záškrtu, botulismus. Studie se může provádět „na sklo“, a v gelu.

lýza reakce (RL)

Imunitní séra, který vstupuje do těla pacienta, má kromě své hlavní funkce pasivní imunity, a to i lytických vlastností. Je schopen rozpouštět mikrobiální činidla, buněčné a cizí prvky virus do těla pacienta. V závislosti na specifitě protilátek obsažených v séru izolovaných bactericidin, cytolysins, spirohetoliziny, hemolysins a další.

Tyto specifické protilátky se nazývají "doplněk", Je zjištěno, téměř ve všech tělesných tekutinách, má složitou strukturu bílkovin a je velmi citlivý na zvýšení teploty, protřepe, kyselin a přímým slunečním světlem. Ale v sušeném stavu je schopna udržet své lytické vlastnosti až šest měsíců.

Tam jsou některé druhy sérologické testy tohoto typu:

- bakterioliz-

- hemolýza.

Bakteriolýza se provádí pomocí pacientova krevního séra a specifickou imunitní sérum s živými mikroorganismy. V případě, pak výzkumník vidí lyži bakterií, a reakce se považuje za je přítomen v krvi dostatečný počet pozitivních komplementu.

Druhý krev sérologická odpověď je, že suspenze erytrocytů léčeného pacienta sérum obsahující hemolysins, které jsou aktivovány pouze v přítomnosti určitého kompliment. Jestliže je tam jeden, pak v laboratoři sledujeme rozpad červených krvinek. Tato reakce je široce používán v moderní medicíně pro stanovení titru komplementu (tj jeho nejmenší množství vyvolání lýzy červených krvinek) v krevním séru a k výrobě testu vazby komplementu. To bylo tímto způsobem provedeno sérologická reakce na syfilis - Wasserman reakce.

vazby komplementu (RSK)

Tato reakce se používá k detekci sérových protilátek pacientovi infekčního agens, stejně jako k identifikaci původce jeho antigenní struktury.

Až do této chvíle jsme popsali jednoduchý sérologické testy. RAC považován za obtížný reakci, protože se vzájemně ne dva, ale tři prvky: protilátky, antigen a doplňovat. Jeho podstata spočívá v tom, že interakce mezi protilátkou a antigenem se vyskytuje pouze v přítomnosti proteinů kompliment, které jsou adsorbovány na povrchu vytvořeného komplexu K-AT.

Samy o sobě antigeny po přidání doplňku, k podstatným změnám, které ukazují na kvalitu reakce. To může být lýze, hemolýza, znehybnění, baktericidní nebo bakteriostatický účinek.

Reakce samotná probíhá ve dvou fázích:

1. Tvorba antigen-protilátka, který není vizuálně patrné výzkumník.
2. Změna antigen při působení komplementu. Tato fáze obvykle lze sledovat pouhým okem. Není-li vidět vizuální odezvu, pak použijte dodatečný indikační systém, který umožňuje detekovat změny.

indikátor systému

Tato reakce je založen na vazbu komplementu. Zkumavky hodinu po nastavení RSK přidány purifikované ovčí erytrocyty a v séru hemolytická neobsahující komplement. V případě, že trubka byla ponechána nenavázaného komplement, bude vstup do komplexního N-AT, vytvořeného mezi ovce krvinky a hemolyzinu, a způsobují jejich rozpouštění. To by znamenalo, že DGC je negativní. Pokud se červené krvinky zůstal neporušený, pak v souladu s tím je reakce pozitivní.

hemaglutinace (RHA)

Existují dva zásadně odlišné hemaglutinace. Jeden z nich - sérologické se používá stanovení krevních skupin. V tomto případě se erytrocyty interakci s protilátkami.

A druhá reakční nesouvisí s sérologického, protože červené krvinky reagovat s hemaglutininu produkované viry. Vzhledem k tomu, každý budič působí pouze na specifické erythrocytů (kuře, ovce, opice), lze předpokládat, tato reakce úzce specifické.

Jasná pozitivní nebo negativní reakce, je možno pro umístění krevních buněk na dně zkumavky. V případě, že se podobá obr invertovaný deštník, poté byl požadovaný virus je přítomen v krvi pacienta. A pokud jsou vytvořeny všechny červené krvinky jako minci sloupy, nejsou tam žádné neznámé patogeny.

Reakce inhibice hemaglutinace (HAI)

Tato vysoce specifická reakce, která umožňuje stanovit tvar, typ viru nebo přítomnost specifických protilátek v séru krve pacienta.

Video: Chemie lekce v EPF na stupeň 8 „typů chemických reakcí na vlastnosti vody příkladu“

Jeho podstata spočívá v tom, že protilátky přidané do zkumavky obsahující zkušební materiál, zabraňuje ukládání antigenů na erytrocytech, čímž se zastaví hemaglutinaci. Jedná se o kvalitativní údaj o přítomnosti specifických antigenů v krvi na konkrétní požadované viru.

Reakce imunofluorescence (RIF)

Reakce je založena na schopnosti identifikovat komplexy s AT-AH fluorescenční mikroskopie po barviv ošetření flyuorohromnymi. Tento způsob je jednoduchý na použití, nevyžaduje izolaci čisté kultury a vyžaduje jen málo času. To je nezbytné pro rychlou diagnózu infekčních chorob.

V praxi jsou tyto sérologické testy jsou rozděleny do dvou kategorií: přímé a nepřímé.

Přímý RIF produkoval antigen, které byly předtím zpracovány fluorescenční sérum. A nepřímý je to, že lék se nejprve zpracuje s konvenční diagnosticum obsahující protilátky proti požadovanému antigenu a potom znovu použity fluorescenční syrovátka, která je specifická k proteinům komplexu K-AT, a mikrobiální buňky stanou viditelné mikroskopicky.